无菌隔离器的包装完整性确认

　　一些材料对杀菌剂有影响，这些材料能抑制微生物的生长。我们关注的是杀菌剂在产品包装上的穿透（能力），在一些辅助设施例如过滤装置和管道的穿透力、在一些能够和产品、培养基、无菌试验的稀释剂接触的材料上的穿透力。在灭菌过程中，操作者有责任核实包装物、培养基、辅助物品在被批准使用的灭菌过程中没有受到影响。带旋转帽的管状容器、胶塞密封的小瓶、卷曲的褶皱已经被证明能够降低杀菌剂的穿透力。金属箔包装并且密封的容器能够防止杀菌剂的进入；然而，这些情况也能够导致一些表面不被灭菌。

　　在多数情况下，在进行无菌检验之前，操作者使用杀菌剂处理产品包装表面来减少进入无菌隔离器物品的生物负荷量。操作者有责任通过验证证明：使用杀菌剂处理产品包装这个过程，存在于产品内部的低水平的微生物污染没有受到杀菌剂的影响，不会影响到检验的检出限度。建议用化学和微生物试验来检测包装物对污染的抵制能力。经过隔离器全部的灭菌过程后，杀菌剂对于细菌和真菌的抑制情况的验证需要进行（参照无菌隔离器的性能验证）。对于医疗装置的包装、药品的包装和密封系统包装的要求都是一致的。不论无菌检验用培养基还是环境控制用的培养基，在无菌检验时，都必须符合需氧菌、厌氧菌、真菌的生长促进试验。

　　隔离器内部环境的无菌保持

　　在一个无菌周期内，隔离器系统保持内部环境无菌的能力必须被验证。隔离器系统出现故障或者隔离器内部的偶然污染情况下的微生物必须被检测。微生物检测通常包括一个例行的取样程序，它可以包括，例如，灭菌后的第一天和无菌保持期的最后一天。放置在隔离器中的培养基被证明是无菌的。

　　隔离器内部可以使用平面接触双碟或者棉签搽拭监控。然而，因为培养基残留会使隔离器产生染菌的风险，因此，最好在检验完成后进行检测。如果试验中有培养基残留，细心地从隔离器内部清理干净。空气取样和培养基检测双碟可以使用，但它们在检测隔离器内部非常低水平的污染时不是很灵敏。

　　最可能污染的途径是检验用具和样品进入隔离器的过程。验证所有进入隔离器内部的物品是无菌的这一点是关键的，也应当定期检查垫圈，确保其完整，避免微生物的进入。手套和半身衣是另一个可能产生污染的来源。因为操作者戴着手套处理无菌检验物品，所以手套是应当特别关注的，手套上微小的破损很难检查出来，手套在使用时，在拉伸情况下，手套上微小的破损可以体现出来（注意：培养基接触法检测手指菌落的方法，在检测低水平的污染时灵敏度是不足的。用0.1%的蛋白胨水溶液浸泡手套，将溶液过滤，然后将滤膜放在生长培养基碟子上检测，这个方法可以检测出其他方法检测不出的泄露。）隔离器内部进行连续的尘埃粒子检测是理想的，这样可以快速检测到过滤器的泄露。第二个选择是使用便携式的尘埃粒子检测器进行周期检测。尘埃粒子检测取样不能对隔离器内部的无菌环境产生风险。